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各位战友
我实验室用的是Therimosci公司的SYBR试剂盒，说明书上要求DNA的量<500ng
但是测得CDNA浓度都在1000-2000多ng/ul
我第一次没注意500ng的问题就直接加了2ulcDNA结果CT值非常高
如果按500ng算，加的就不到1ul的量了，这样CT不是更高了嘛这样加对吗？？
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回复：时间：2017-04-24
Rose玲A260／280,A260／230怎么样，逆转录按RNA多少来逆的都在正常范围的取了2ug的RNA反转录最后realtimePCR取了总量500ng加的说明书要求的量引物也在规定范围新配的结果actin跟目的基因基本都没有值出来。。。
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回复：时间：2017-04-19
nanakaro都在正常范围的取了2ug的RNA反转录最后realtimePCR取了总量500ng加的说明书要求的量引物也在规定范围新配的结果actin跟目的基因基本都没有值出来。。。2ugRNA逆的话，逆好的CDNA我们一般都加水稀释的，你可以取几ulcDNA原液稀释5倍再点，还有你要看一下逆转录体系和程序以及qPCR的程序和体系有没没错误
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回复：时间：2017-04-14
Rose玲2ugRNA逆的话，逆好的CDNA我们一般都加水稀释的，你可以取几ulcDNA原液稀释5倍再点，还有你要看一下逆转录体系和程序以及qPCR的程序和体系有没没错误谢谢你啊我都检查过了跟说明书都一样的实验室也用了很久了。。。到我做就不行了
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回复：时间：2017-04-22
Rose玲2ugRNA逆的话，逆好的CDNA我们一般都加水稀释的，你可以取几ulcDNA原液稀释5倍再点，还有你要看一下逆转录体系和程序以及qPCR的程序和体系有没没错误找到问题了谢谢战友啦
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