定量PCR

2021-07-22实时定量PCR的结果是怎样分析的

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如果有标准曲线,按照标准曲线计算。一般都是相对量。则用delta delta CT方法来计算。举例如下:对照组基因A的CT值为20, 内参(比如βactin)CT值15。实验组基因A CT值18,内参CT值14。首先算加样量:delta CT=15-14=1。2的1次方是2。也就是说实验组的加样量是对照组的2倍。基因A: delta CT=20-18=2。2的2次方是4。也就是说基因A的量在实验组是对照组的4倍。但是由于加样量是2倍,所以4处以2=2,最后的相对量是2倍。几点注意:1。必须确定扩增的特异性2。 只有相同目标的CT值才能相减(扩增效率有可能不同)3。 2的某次方只是理论值,实际扩增效率低于2。4。 最好不用Syber Green