组织标本

细胞组分的化学反应实验一过碘酸雪夫反应(PAS)

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实验方法原理组织、细胞的多糖、粘多糖及粘蛋白等都可用PAS法来显示,其化学基础是利用过碘酸的氧化作用,打开碳链形成醛,生成的醛基与Schiff试剂中的无色品红反应形成紫红色化合物。
实验材料
试剂、试剂盒
仪器、耗材
实验步骤
一、方法

1. 取1~2mm厚的肝组织块,用Carnoy氏液4℃固定4~6小时。

2. 乙醇脱水、二甲苯透明。石蜡包埋,切片。

3. 用70%乙醇展片。

4. 脱蜡:二甲苯(1)5分钟→二甲苯(2)5分钟→100%乙醇5分钟→含1%火棉胶的乙醇液1分钟→70%乙醇1分钟。

5. 直接浸入过碘酸酒精液反应5~15分钟,经70%乙醇洗片刻。

6. 浸入Schiff氏酒精液反应15分钟。

7. 亚硫酸水洗三次,以洗去多余的非特异性结合的色素,以及扩散的染料。

8. 流水冲洗3~5分钟。

9. 蒸馏水洗。

10. 浸入Ehrlich苏木精复染20~30秒,使细胞核着色。

11. 脱水:95%乙醇3分钟二次→100%乙醇3分钟二次→二甲苯透明10分钟二次。

12. 加盖片镜检或树胶封固后镜检。

二、结果

细胞中呈紫红的颗粒即为糖原。
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