莽草酸脱氢酶测定实验一基本方案
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| 实验方法原理 | 莽草酸：NADPH＋3-氧化还原酶。 3-脱氢莽草酸＋NADPH＋H＋→莽草酸＋NADP＋ 测定逆反应。 |
|---|---|
| 实验材料 | 莽草酸脱氢酶稀释溶液 |
| 试剂、试剂盒 | 莽草酸碳酸钠NADP |
| 仪器、耗材 | |
| 实验步骤 | 实验所需「试剂」具体见「其他」 0.98ml实验混合物
0.02ml酶稀释溶液 25℃时，于340mn处吸收值降低。NADPH的吸收系数ε340＝6.3×103l/（mol·cm）。 |
| 注意事项 | |
| 其他 | 试剂 0.1mol/L碳酸钠，pH10.6［Na2CO3，Mr＝106；10.6g/L，用0.1mol/L（约8.4g/L）NaHCO3调节pH至10.6］ 0.1mol/L莽草酸（Mr＝174.2；174mg溶于10mlH2O） 0.1mol/LNADP（Mr＝787.4；二钠盐，787mg溶于10mlH2O） |
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