SDS电泳的制胶方法与“垂直平板电泳的制胶”和“水平平板电泳的制胶”所述的常规聚丙烯酰胺凝胶的灌注方法基本相同，只是在SDS电泳制胶时单体贮液不需要抽气，以免产生泡沫，且聚合后的凝胶在室温下，而不是在4℃放置过夜，这样既可使凝胶充分聚合，以提高电泳的分辨率，又防止SDS在凝胶中结晶。自制的SDS凝胶最多可在室温下保存4天。因为SDS的高pH会使丙烯酰胺水解。如果需要长期保存，最好选用pH6.7的Tris-醋酸缓冲液。

不管是垂直电泳，还是水平电泳，SDS连续电泳用的凝胶灌注方法十分简便，请参阅“制胶”。表5.4为凝胶配方，贮液配置如下：

1.丙烯酰胺单体贮液

11.1g丙烯酰胺+0.3gN，N"-甲叉双丙烯酰胺，先用35ml双蒸水溶解，搅拌，直到溶液变成透明，再用双蒸水稀释至50ml,过滤。用棕色瓶可在4℃保存一个月。两种丙烯酰胺单体及溶液是中枢神经毒物，要小心操作。

2.磷酸缓冲液贮液（0.2mol/L，pH7.1)

19.5gNaH₂PO₄·2H₂O+129.0gNa₂HPO₄·12H₂O+5gSDS，用双蒸水溶解到2.5L，检査pH。

3.咪唑缓冲液贮液（0.1mol/L，pH7.0)

17.0g咪唑+5gSDS+1.5L双蒸水，用稀磷酸调至pH7。用双蒸水稀释至2.5L，再检査pH。

4.10%过硫酸铵

0.1g过硫酸铵+1ml双蒸水。使用前新鲜配制。



在不连续电泳系统中，LaemmLi使用的Tris-甘氨酸缓冲液仍然是现在通常使用的缓冲系统。表5.5为凝胶配方，贮液配置如下：

1.丙烯酰胺单体贮液

14.55g丙烯酰胺+0.45gN，N"-甲叉双丙烯酰胺，先用35ml双蒸水溶解，搅拌，直到溶液变成透明，再用双蒸水稀释至50ml，过滤。用棕色瓶可在4℃保存一个月。两种单体和溶液都是中枢神经毒物，要小心操作。

2.浓缩胶缓冲液贮液（1mol/LTris-HCl，pH6.8)

6.06gTris溶解在40ml双蒸水中，用4mol/L盐酸调节pH至6.8，再用双蒸水加至50ml。4℃保存。

3.分离胶缓冲液贮液（1.5mol/LTris-HCl，pH8.8)

9.08gTris溶解在40ml双蒸水中，用4mol/L盐酸调节pH至8.8，再用双蒸水加至50ml。4℃保存。

4.10%SDS

25gSDS，用双蒸水溶解至250ml。室温保存。

5.10%过硫酸铵

0.1g过硫酸铵+1ml双蒸水。使用前新鲜配制。

6.10%TEMED

0.1mlTEMED+0.9ml双蒸水

灌注垂直电泳用的凝胶必须按“垂直平板电泳的制胶”中所述的方法，先灌注分离胶，加保护层，聚合后再灌注浓缩胶，并插入合适的梳子。



灌注水平电泳用的凝胶可以先灌注浓缩胶，接着灌注分离胶，所以在浓缩胶中应加适量的87%甘油，见表5.6。灌注方法请参阅“水平平板电泳的制胶”。



1980年Gorg等介绍薄层聚丙烯酰胺小孔梯度凝胶SDS电泳。由于小孔梯度凝胶的分子筛效应以及甘油黏度减小了电泳中的扩散，即使对宽范围分子质量的复杂样品也能很好地分离并精确地计算其亚基分子质量。

小孔梯度凝胶的灌注方法参见“水平平板电泳的制胶"。凝胶配方见表5.7，贮液配置如下：

1.丙烯酰胺单体贮液

14.55g丙烯酰胺+0.45gN，N"-甲叉双丙烯酰胺，先用35ml双蒸水溶解,搅拌，直到溶液变成透明，再用双蒸水稀释至50ml,过滤。用棕色瓶可在4℃保存一个月。两种单体和溶液都是中枢神经毒物，要小心操作。

2.浓缩胶缓冲液贮液（0.5mol/LTris-HCl，0.4%SDS，pH6.8)

3.03gTris+0.2gSDS+5mg叠代钠溶解在40ml双蒸水中，用4mol/L盐酸调至pH6.8，再用双蒸水加至50ml。4℃保存。

3.分离胶緩冲液贮液（1.5mol/LTris-HCl，0.4%SDS，pH8.8)

9.08gTris+0.2gSDS+5mg叠代钠溶解在40ml双蒸水中，用4mol/L盐酸调至pH8.8，再用双蒸水加至50ml。4℃保存。

4.40%过硫酸铵

400mg过硫酸铵溶在1ml双蒸水中，使用前新鲜配置。