电泳仪

单向聚丙烯酰胺凝胶电泳实验一InstaStain Blue 凝胶纸染色实验

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实验材料
仪器、耗材
实验步骤

1.电泳结束后,在一塑料容器中倒入足够浸没凝胶的水,例如,一块典型的mini胶(8cmXl0cm或8cmX8cm)需要IOOml水。将凝胶放入容器中,轻摇5min。

2.用水重复洗两次以上(洗涤的总时间是l5min)。

3.弃去水,加入足够浸没凝胶量的试剂A,室温下摇动凝胶1〇111^。

4.从试剂A中取出凝胶,放置到一块玻璃板上。注意保持凝胶湿。

5.将InstaStamBlueGelStainPaper放到凝胶上,注意蓝色面朝下。用玻璃棒碾平赶出气泡。

6.用试剂A湿润三张滤纸,将湿润的滤纸放置到instastainBlue凝胶染色纸上面。用玻璃棒碾平赶出气泡。I^

7.把第二块玻璃板放到滤纸上。

8.将凝胶/纸/玻璃板夹层放进微波炉,用「高」档加热至温热(约8s)。勿让凝胶过热,胥则会粘住InstaStainBlue凝胶染色纸。

9.移去上层玻璃板、滤纸和InstaStainBlue凝胶染色纸,将凝胶放进装有足够浸没凝胶的试剂A的容器中。

实验提示:如果凝胶粘住了凝胶染色纸,将它们一起放入试剂A中,不断摇动直至纸能从胶上剥离下来,然后把凝胶转入新鲜的试剂A中。

10.室温摇动凝胶Ih。

11.弃去试剂A,室温下用水清洗凝胶至少Ih直到背景变得理想。这样,含有20ng蛋白量的条带就能显现。

这块凝胶能在水中保存过夜,而且灵敏度不会降低,条带的颜色也不会变浅。