相关文章
促销商品
最新问答
- [06-22]SDSPAGE的电泳仪是否可以用来做IEF? 蛋白质和糖学技术讨论版...
- [04-03]【求助】请教一个SDSPAGE灌胶问题 经验共享 ...
- [01-02]电泳仪常见问题及其解决方法
- [04-16]【求助】紧急求助急急急western 电泳问题
- [06-03]【求助】新手——关于电泳仪的问题 核酸基因技术讨论版论坛
- [05-14]【北京安创科技有限公司面试|面试题】看准网
- [01-02]电泳仪DYCZ24EN(国产)如何制胶
- [08-29]德诺杰亿国产全自动毛细管电泳仪获NMPA医疗器械证书
- [03-20]【TBE配制的问题.非常急用,TBE配制的时候用Trishcl而不是Tris...
热卖商品
5.2.3 氢氧化甲基汞琼脂糖凝胶电泳一氢氧化甲基汞琼脂糖凝胶电泳
试剂、试剂盒 | 4X甲基汞凝胶电泳缓冲液2X凝胶加样缓冲液溴化乙锭乙酸铵溶液 仪器、耗材 | 水平电泳装置水浴
实验步骤 | (一)材料与设备 1)水平电泳装置。 2)水浴 3)4X甲基汞凝胶电泳缓冲液:200mmol/L硼酸,20mmool/LN2B4O7.H2O,40mmol/LNa2S04(pH8.0) 4)2X凝胶加样缓冲液: lmol/L氢氧化甲基汞 25u1 4X甲基汞凝胶电泳缓冲液 500ul 甘油 200ul 溴酚蓝 2ug 5)0.5ug/ml溴化乙锭 6)0.lmol/L乙酸铵溶液 (二)操作方法 1)制备凝胶:大于或等于1kb的RNA用1%琼脂糖,小于1kb的RNA用1.4%琼脂糖.将琼脂糖溶于1X甲基汞凝胶屯泳缓冲液,冷却至55°C后,加氢,氧化甲基汞至终浓度为5mmol/L,随后灌胶。 2)电泳:将等体积的2X凝胶加样缓冲液与RNA溶液混勻,点样,电泳。 3)结果观察:电泳结束后,用含0.4g/ml溴化乙锭的0.lmol/L乙酸铵溶液浸泡凝胶即30〜45min,进行RNA染色,在紫外灯下观察。铵离子使甲基汞转化为带电的非挥发性复合物,并促使溴化乙锭与RNA的结合。 注意事项 | 1)氢氧化甲基汞是剧毒品,且挥发性极强.最好在通风橱中操作。 2)氢氧化甲基汞应加入凝胶中而不能加入到甲基汞凝胶电泳缓冲液中。这种化合物不带电荷,因此不能很快迁移出凝胶。然而如果电泳过程中将凝胶浸在电泳液中,则甲基汞离子会扩散至凝胶外。为避免这问题,可调整电泳缓冲液的液面,使之能与凝胶的各边保持完全接通,而不溅到凝胶表面。加样完毕且RNA进入凝胶后,用保鲜膜覆盖凝胶,以防止它在电泳过程中干涸。
================ 蚂蚁淘在线 ================ 免责声明:本文仅代表作者个人观点,与本网无关。其创作性以及文中陈述文字和内容未经本站证实,对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不做任何保证或承诺,请读者仅作参考,并请自行核实相关内容 版权声明:未经蚂蚁淘在线授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经经本网授权使用作品的,应该授权范围内使用,并注明“来源:蚂蚁淘在线”。违反上述声明者,本网将追究其相关法律责任。 相关阅读
|
---|