电泳仪

微量制备毛细管电泳实验一单次分离

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实验方法原理


实验材料
试剂、试剂盒
仪器、耗材
实验步骤

1.制备多肽混合物和预处理柱子(见多次分离步骤1和2)。


2.在0.5lb/in2,10s内用低压注射上样0.1μl多肽混合物。


3.使用以下条件分离多肽混合物:

电解质:0.05mol/L磷酸钠缓冲液,pH2.30

探测波长:200nm

温度:25℃

电压:7.5kV

分部大小:每收集管3min


4.用一系列的含10μl4:1(V/V)0.5mol/L磷酸钠缓冲液/乙烯乙二醇的微量锥形瓶替换标准的出口池(正极)。收集3min的流分于每一个瓶子用于分析分离的长度。


5.用分析分离方法(见解析多肽分离实验)筛选含多肽的流分。

注意事项

对于单收集方法,CE仪器必须能有效地控制在高电压水平时的毛细管温度,因为高电压水平是电泳所必需的。鼓风式冷却通常不适合该目的。

其他