蛋白纯化试剂盒

从抗血清、腹水或杂交瘤上清液中纯化免疫球蛋白G组分一饱和硫酸铵沉淀IgG

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实验方法原理虽然亲和层析法是进行特异性抗体纯化的首选,然而有时这种纯化方式却非必需,或者无法实施进行(如有时抗原量不充足)。
实验材料
试剂、试剂盒
仪器、耗材
实验步骤

1)于4℃不断搅拌,往2体积的抗血清、腹水或组织培养上清中,逐滴加入1体积SAS溶液。加完后置于4℃,不间断地搅拌2〜4h以形成沉淀。


2)4℃12OOOg离心20min,用预冷的溶于PBS的33%SAS溶液在涡旋混合器上振荡洗涤沉淀,所用溶液的体积与原抗血清、腹水或组织培养上清等体积,重复洗涤。


3)在涡旋混合器上温和振荡将沉淀溶于合适的预冷的缓冲液中(5%〜10%的原始体积)。


4)4℃透析IgG溶液48h以上,期间换3次(每次换4L)所需缓冲液,以去除硫酸铵。

注意事项
其他