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新鲜实体组织样本的制备（酶消化法）
蚂蚁淘
/发布时间:1533849374 /浏览量:228
| 实验方法原理 | 对实体组织分散的作用原理主要有3个方面：①可以破坏组织间的胶原纤维、弹性纤维等；②可以水解组织间的黏多糖等物质；③可以水解组织细胞间的紧密联结装置的蛋白质物质。 | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 实验材料 | 组织酶 仪器、耗材 | 试管离心管尼龙网
实验步骤 | 1.将适合于酶消化的组织置于离心管中。 2.将选好的酶溶掖1~2ml加入盛有被消化组织的试管中。 3.一般消化20~30min(恒温37℃或室温)，消化期间要间断振荡或吹打。 4.终止消化，收集细胞悬液，以300日尼龙网过滤，除去细胞团块，以低速离心除去细胞部片。 5.将制备好的单细胞悬液进行荧光染色后上机检测，或保存备用。 注意事项 | 1.酶需要溶解于适当的酶液中，而这些溶液不至于造成酶效价降低。 2.要注意酶的使用浓度和消化时间。 3.要注意酶活性的pH值，胃蛋白酶在碱性环境中会失去活性，而胰蛋白酶在中性溶剂中活性不佳。 4.要随时注意影响酶活性的其他因素，如酶的生产批号等。
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