其它天然蛋白

2021-07-24【求助】天然蛋白提取时加入尿素 的目的

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从组织中粗提蛋白时加尿素是为了增加蛋白的溶解,是吧?一般用多大浓度呢?

但是尿素是否会导致天然蛋白的失活呢?通过透析除去尿素后蛋白能“复活”吗?
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回复:时间:2005-10-29

据我所知尿素的作用就是降低了蛋白质的活度系数使其溶解,当然要求是低浓度的,要是浓度高了就产生负面影响。适当浓度尿素是不会使蛋白变性的,所以放心使用了。

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回复:时间:2005-10-22

尿素的作用可溶解蛋白质,有些文献中用8M的浓度(配置溶液时需要加热才能溶解尿素).溶解后可能会变性,需要复性.我的蛋白复性的过程于下:(1)将蛋白溶液放入低吸附试管内,缓慢滴加等体积的PBS,轻摇混匀,置冰上30min(此时尿素浓度降至4M);(2)将溶液转入透析袋中,然后将透析袋浸于透析液(3MUrea、2mMGSH、0.2mMGSSG、PBSpH7.4)中,4℃搅拌透析过夜;(3)次日将透析液更换为(2MUrea、2mMGSH、0.2mMGSSG、PBSpH7.4),并缓慢向透析杯中滴加1000mlPBS,以缓慢降低Urea浓度,使蛋白自然复性。(4)最后用聚乙二醇(PEG400)浓缩复性蛋白。

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回复:时间:2005-10-27

urea也有裂解细胞释放蛋白的作用,如果是天然蛋白(除脂类蛋白)一般是比较好溶的,因此我想加尿素的目的可能更偏向于裂解细胞。