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小弟用E.coli表达的一蛋白(一天然毒素的N段)制备了11株单抗,但没有一株能中和天然蛋白,这可急死我了.再拖下去就不能毕业了.导师天天催我建立诊断方法呢.大家给我出出主意!
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回复：时间：2007-02-02
luliangshun小弟用E.coli表达的一蛋白(一天然毒素的N段)制备了11株单抗,但没有一株能中和天然蛋白,这可急死我了.再拖下去就不能毕业了.导师天天催我建立诊断方法呢.大家给我出出主意!你的问题主要出在表达的蛋白结构和天然蛋白的结构不同,所以你的免疫原不行,造成制备的抗体也不能识别天然蛋白,表大的蛋白多时线性表位,天然蛋白存在空间表位,你可以将要检测的蛋白变性后检测看看,或者用天然蛋白做WB检测应该没有问题!
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