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一种染料的激发发射波长是488/560nm,显红色,其在细胞内分布未知,一种是核染料DAPI,这两种是确定会存在的荧光物质,而现在想选择一种能染出细胞轮廓(细胞膜或细胞骨架)的荧光染料,不知可选择哪些荧光染料染的效果比较好。FITC-鬼笔环肽不知是否可以,因为FITC的激发发射波长是495/520nm,想知道选择FITC-鬼笔环肽的话,在做共聚焦时会不会跟488/560nm的染料有干扰?因为好像使用的是同一个激发器。
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回复:时间:2012-03-07
要看你的共聚焦显微镜的激光管和滤光片配置,比如某台机器上有500-550nm的带通滤片可以采集FITC的荧光,>570nm的高通滤片可以看你的第一种红色染料,而DAPI是紫外激发的染料,紫外激发的时候另外两种染料不发光,这样就可以满足你的检测要求。根据机器配置适当的选择染料就好
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回复:时间:2012-03-07
谢谢!我用的仪器是有4个独立激光器:(1)405nm激光;(2)458/488/514nm激光;(3)543nm激光;(4)633nm激光。但滤光片的配置没看到有写在仪器参数里,管仪器的老师也不清楚,所以也不知道到底会不会干扰?
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