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分子生物学实验一PCR 检 测 细 胞 因 子 m R N A 的表达
实验方法原理 | |
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实验步骤 | 基本方案定量IL-2mRNA表达水平材料内参照:转录质粒载体(含有临床生物检测标本相关的cDNA) 胍盐溶液 50U/ulRNasin 0.5mg/mlolig(dT)16 lmg/ml乙酰化的BSA 4dNTP混合液 200U/ulMo-MuLV反转录酶 1〇X无MgCl2PCR扩增缓冲液 扩增引物:20umol/l5’端和3’端目的细胞因子特异性引物(表14.5.1和表14.5.2) 5U/ulTaqDNA聚合酶 矿物油 含有Iug/ml溴化乙锭的3%琼脂糖胶(m/V)(附录1) DNAMarker 13mmXIOOmm组织研磨器 1.5ml和0.5ml离心管,高压灭菌 65°C和39°C水浴 注意:当处理人血细胞或者传染物时,必须按照生物安全程序(前言)进行 |
注意事项 | |
其他 |
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