克隆基因

分子生物学实验一PCR 检 测 细 胞 因 子 m R N A 的表达

实验方法原理
实验步骤

基本方案定量IL-2mRNA表达水平

材料

内参照:转录质粒载体(含有临床生物检测标本相关的cDNA)

胍盐溶液

50U/ulRNasin

5X反转录酶缓冲液

0.5mg/mlolig(dT)16

lmg/ml乙酰化的BSA

4dNTP混合液

200U/ulMo-MuLV反转录酶

1〇X无MgCl2PCR扩增缓冲液

扩增引物:20umol/l5’端和3’端目的细胞因子特异性引物(表14.5.1和表14.5.2)

5U/ulTaqDNA聚合酶

矿物油

含有Iug/ml溴化乙锭的3%琼脂糖胶(m/V)(附录1)

DNAMarker

13mmXIOOmm组织研磨器

1.5ml和0.5ml离心管,高压灭菌

65°C和39°C水浴

注意:当处理人血细胞或者传染物时,必须按照生物安全程序(前言)进行



注意事项
其他

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