克隆基因

2021-07-31急急急急急急!!!克隆基因目的片断大小为180bp左右、可行吗?

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本人是个菜鸟、设计引物时忘记考虑目的片断大小了!引物已经合成了、才发现克隆基因目的片断大小为180bp左右、是兼并引物来克隆未知基因片断、再做全基因克隆。向大家请教一下,这样做可行吗?是不是片断太小???老板还不知道、估计要废废了。恳请大家多多指教。有没有什么补救的办法?好的建议?????
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相关回复

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回复:时间:2006-12-03

不错啊!将180bp克隆测序,序列在ncbi上blast比对一下,看是否你的目的基因,再作下一步的3‘RACE和5’RACE,即可获得全长基因。

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回复:时间:2006-12-01

180bp可能在蓝白斑筛选时会出错,片段过小,有可能找不到白斑了。

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回复:时间:2006-12-01

只提醒一个问题:多切几管多回收,越多越好。

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回复:时间:2006-11-26

谢谢各位!我试一试!~

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回复:时间:2006-11-22

180bp的基因还需要克隆吗?直接合成就行了,或者自己拿3,4条引物相互进行PCR反应即得结果,屡试屡爽。

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回复:时间:2006-11-27

兼并引物来克隆未知基因片断、再做全基因克隆。未知基因序列如何合成?敬请指教!先谢谢了!

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回复:时间:2006-11-25

bentz180bp的基因还需要克隆吗?直接合成就行了,或者自己拿3,4条引物相互进行PCR反应即得结果,屡试屡爽。180bp只是基因中的一部分,他要做的是预测与克隆基因,如果都不知道基因的序列,如何去合成啊?根据其他物种的同源性,用兼并引物拉出180bp序列,然后在中间设计一条上游引物,并做3’race,已经是比较常规的方法了。