载体

2021-08-24启动子报告基因慢病毒载体

分享到: 微信 更多

请教一下,一般做启动子报告基因检测,载体用pGL3,pGL4双荧光报告基因质粒,但pGL3,pGL4都只能做瞬时转染,我的细胞(不想用293做实验)质粒转染后都会死很多,还要加上一些处理因素(比如药物,饥饿等),细胞状态更不好了。所以想找一个慢病毒骨架的报告基因质粒。

上网查了下,SBI的pGreenFire1和Genecopia的Gluc-ON是慢病毒质粒。

1.pGreenFire1可以检测Luc和GFP,但用什么做内参呢?查了下文章,有的文章检测Luc的时候同时检测一个MTS读数做内参;另外有一篇文章用qPCR的方法检测了GFP和GAPDH,用GAPDH做内参。不确定这样是不是正确呢?

2.Gluc-ON检测的是分泌型的Gluc,载体上还有分泌型的碱性磷酸酶做内参。

不知有没有哪位以前用过这两个质粒的?文章用这两个质粒的都不多,不知投稿的时候会不会被质疑?


*请输入10-500个字符

相关回复

已帮助 0

回复:时间:2017-08-15

我们有自己做的一个Luc2-GFP的报告基因慢病毒载体,可以用于启动子活性检测。