啮齿动物体内的病毒投递

材料

试剂

动物：大鼠或小鼠

BHK-21细胞

克他命

病毒储存液

根据方案1制备可表达目的基因的重组a病毒，使用前需要用〇•22um滤器过滤灭菌。

Xylazine

仪器

滤器•（无菌，0.22um，微孔)

Hamilton注射器（10/m1)

注射器（不锈钢）

微型输液泵

聚乙烯管

定向设备

方法

在全身麻醉并伴有体温调节控制及氧气补充的情况下进行微注射。

1.用方案3确定病毒储存液在BHK-21细胞中的大概滴度。

2.稀释病毒，使之适用于实验条件。

对纹状体、扁桃体或脑皮层，使用IO⁵个病毒颗粒；对脑室，使用IO⁷个病毒颗粒。

3.通过每千克体重腹膜内注射200mg克他命和IOmgxylazine来麻醉实验动物。

4.根据动物调整定向设备。

5.用不锈钢注射器吸取病毒，通过聚乙烯管连接微型输液栗和IOulHamiltonsyringe。

6.以0.5ul/min的速度融合病毒溶液。

7.将针在原位多放置2min。

8.将针缓慢的拿开。

9•缝合伤口，手术后3〜4h内使动物处于温暖的环境下。

10•简单的健康检测（如体重、体温和食量等）和行为反应。

11.在注射后的不同时间点，收集组织和鉴定转基因的表达