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Ultra克隆让载体和片段:“一见钟情,5min牵手成功”
2017年已结束
这一年里
你一共有299天来了实验室
你喜欢在下午和晚上做实验
你热衷的实验谜雾重重
你习惯默默做实验
却很少输出自己的实验成果......
我的实验日记
2017,
实验记录本里用到的较多的词是“载体构建又失败”、“假阳性”、“没长斑”......
构建载体没有合适的限制性内切酶,怎么办?
我有4个片段要连接到载体上,一次又一次,杀了我吧?
好不容易连上了,序列连接反了是什么鬼?
构建个载体动辄三四天!啊,让我回家吧!我要回去找**!
8月8日大概是很特别的一天
这一天里
我一共在12块板子上面挑了60个菌斑
无一例外,全是假阳性
12月24日
这一天我睡得很晚
23时30分还守在电泳槽旁
期待今晚是个平安夜
然而那一晚我的胶图上除了Marker什么都没有
这一年
我有150天都在构建载体
在所有的实验中
我对这个实验最专一,可就是不成功
时光中的实验室
是不散的宴席
我们错过了你的2017,让你走了那么多弯路,
2018,请让诺唯赞无缝克隆试剂陪伴你!
诺唯赞最新推出的ClonExpress®UltraOneStepCloningKit是新一代的重组克隆试剂盒,可用于单个片段和多个片段的重组连接,不受酶切位点限制。
快速5-15min快速完成重组;
简单一管式Mix,操作简便;
高效高效克隆50bp~10kb片段,阳性率>95%;
兼容单片段、多片段、入门克隆三合一;
零背景提供零背景、Amp+/Kan+双抗性载体。
引物设计
设计带有同源序列的引物。
CEDesign:“我是专门设计引物的软件,看我看我看我”
PCR扩增插入片段
用设计的带有同源序列的引物扩增插入片段,使得最终的目的产物带有和载体末端同源的序列。
Phanta高保真酶:“我是的保真度是taq酶的53倍,选我选我选我”
线性化载体
选择合适的克隆位点,对载体进行线性化
酶切和PCR:“我们都可以喔,任君挑选喔(✿◡‿◡)”
重组反应5-15min
按比例混合线性化载体和插入片段
载体和插入片段:“一见钟情,5min牵手成功”
转化
将重组产物直接转化后涂平板,挑取克隆进行阳性鉴定
请联系你身边的诺唯赞小伙伴,速速订购吧!
CEDesign:“报告小编,我要给自己加戏,你们知道是引物设计的神器嘛,分分钟设计好引物不是梦,一起躁起来。
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