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天然培养基配制实验一胶原的配制
蚂蚁淘
/发布时间:1533493975 /浏览量:137
| 实验方法原理 | 胶原是细胞生长良好的基质，它是从动物特定组织中用人工法提取出的，利于组织和细胞的固定，亦属天然培养基。胶原主要用于细胞的附着，能改善细胞表面性质，促细胞生长。胶原可来自大鼠尾腱、豚鼠真皮、牛真皮、牛眼水晶体等，其中以鼠尾胶原最为常用和制备简便，可配制成0.1%—1%的醋酸溶液， | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 实验材料 | 鼠 试剂、试剂盒 | 酒精醋酸 仪器、耗材 | 离心机冰箱
实验步骤 | 1. 取组织 取体重250g左右大白鼠一只，从尾根部切断鼠尾，置75%酒精中浸泡30分钟；无菌条件下将鼠尾切成1.5cm小段，剔除皮毛，抽出尾腱置平皿中； 2. 溶解 取1.5g剪碎尾腱浸入150ml醋酸溶液（0.01—0.25M），置4℃冰箱中，并不时摇动，48小时后，移入灭菌离心管中； 3. 分离 以4000转/分，离心30分钟，吸取上清液，10磅10分钟高压灭菌后分装入小瓶中，－20℃冰箱保存； 4. 使用方法 用吸管吸少许胶原涂于灭菌培养瓶内壁培养面上，不宜太厚，以倾斜瓶时不流动为准； 5. 向培养瓶内通以氨气后封上瓶盖； 或用浸有氨水的棉球堵塞瓶口（或不用氨气处理，而是置37℃温箱过夜；或置室温48小时，再用无菌蒸馏水冲洗凉干亦可），作用30分钟，待胶原凝固，然后用无菌生理盐水冲洗、凉干，即可使用。
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