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这个蛋白做了一个多月了，一直没有结果，我是用碧云天RIPA+PMSF提取的，请问这种膜蛋白需要用专门的膜蛋白提取试剂盒提蛋白吗？求指教求指教
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回复：时间：2021-08-07
一般来说提取总蛋白是可以做出VEGFR2条带的，但要注意以下几个方面：1.确保提取出所有蛋白，特别是膜蛋白。如果是细胞样本，不可用胰酶消化处理，因为胰酶会破坏膜蛋白。提取试剂中最好PMSF和广谱蛋白酶抑制剂都加。2.如果单独提取膜蛋白，结果会更好，更有特异性。碧云天和博士德的膜蛋白提取试剂应该都是可以选择使用的。3.如果蛋白提取没问题，WB实验流程没问题（不仅内参出结果，而且VEGFR2蛋白电泳和转膜都成功），但还是不出条带，那就要怀疑是否是一抗的问题了。
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