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回复:时间:2018-02-26
α-平滑肌肌动蛋白是23kD。 1、如果是提取的总蛋白,然后做WB,用β-actin或者GAPDH做内参肯定是没有问题的,这是公认的东西。 2、如果用膜蛋白提取试剂盒提取蛋白,再用β-actin作为内参似乎不妥,因为理论上来讲β-actin在膜上是不表达的。WB能做出β-actin来是因为膜蛋白提取时把胞质蛋白也提出来了。然而,如果我们试验目的是用药物处理细胞,比较处理前后某种膜蛋白的表达情况,此时用膜蛋白提取试剂盒提取膜蛋白后再用β-actin做内参似乎就不妥了,因为你根本不知道药物处理前后混杂了多少的胞质蛋白进来。如果没有胞质蛋白混进去的话,β-actin就是检测不到的。
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回复:时间:2018-02-27
肌动蛋白是在所有真核细胞中都表达的高度保守的蛋白质.它们沿微管组成了细胞骨架的主要成分.肌动蛋白至少表达为6种异构形式.它在心脏、骨骼横纹肌组织和某些平滑肌组织中表达,调节其收缩功能.它在心脏、骨骼横纹肌组织和某些平滑肌组织中表达,调节其收缩功能.它也在非肌肉细胞的胞质中表达,控制细胞的结构和运动.球状肌动蛋白(G-actin)的多聚化形成纤丝状的结构(F-actin),其形成需要Arp2/3复合物.有报导说肌动蛋白在乳房瘤中是高度磷酸化的.肌动蛋白的功能失调也会导致某种类型的心脏病.平滑肌α肌动蛋白使人更感兴趣,因为编码它的基因是相对局限于在血管平滑肌细胞中表达的少数几个基因之一.而且,平滑肌α肌动蛋白的表达是由激素和细胞增殖所调节,包括致癌转化和动脉粥样硬化等的病理条件会改变其表达.α-肌动蛋白(αActin)由377aa组成,分子量约为42kDa,广泛分布于几乎所有的肌型细胞中.可以用action
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