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2021-07-26请问一下，用试剂盒提取膜蛋白后还需要RIPA裂解，煮沸，然后再进行WB？

iamtangwei1992
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请问一下，我买了一盒碧云天的细胞膜蛋白提取试剂盒，想提取后进行WB检测。但是遇到了两个问题：

1、六孔板中的贴壁细胞需要RIPA裂解，煮沸后，再进行膜蛋白的提取吗？

2、WB上样前，需要加入loADIngbuffer吗？

谢谢各位大神~~

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相关回复

已帮助 0人

回复：时间：2021-08-02

1，看下说明书，估计不用RIPA了，试剂盒里应该都有所需的试剂。2，loading buffer还是要加的跟普通的提蛋白一样，可以观察溴酚蓝的跑出位置。

有用（0）

已帮助 0人

回复：时间：2021-08-01

你好，请问35的皿你提出来的膜蛋白浓度高吗？做WB效果好吗？用胞浆蛋白溶液做内参吗？我刚做的几乎什么都没有，

有用（0）

已帮助 0人

回复：时间：2021-08-05

展开引用iamtangwei1992请问一下，我买了一盒碧云天的细胞膜蛋白提取试剂盒，想提取后进行WB检测。但是遇到了两个问题：1、六孔板中的贴壁细胞需要RIPA裂解，煮沸后，再进行膜蛋白的提取吗？2、WB上样前，需要加入loADIngbuffer吗？谢谢各位大神~~......我也买了这个试剂盒，不过说明书上要求的细胞量很大呀？怎么6孔板就够了呢？

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