上海远慕生物详细为您介绍miRNA提取试剂盒操作说明书，用途，注意事项，品牌，价格等，本司是美国Omega品牌代理商，代理旗下所有产品，部分系列有：96孔板RNA提取试剂盒I，96孔板病毒总RNA纯化试剂盒，磁珠病毒ＤＮＡ/ＲＮＡ纯化试剂盒，磁珠组织RNA提取试剂盒，RNA室温保护液，RNA保护液，微量病毒ＤＮＡ／ＲＮＡ共提取试剂盒，其他系列等，价格实惠，订购！

名称：miRNA提取试剂盒

品牌：Omega

供应商：上海远慕

用途：从细胞、动物、植物组织中同时提取小分子RNA或大分子RNA

miRNA提取试剂盒的提取目前主要采用两种方法：Trizol法和离心柱法，操作步骤极为简单、无需过柱、去大RNA/DNA、再沉淀等复杂的步骤，即可获得高产量、高纯度、不含大RNA的小RNA。适用于高通量提取，2h内可完成24个样品的提取工作。应用该miRNA提取试剂盒提取的小RNA（SmallRNA）中，长度在15～200nt范围的RNA>90%，基本不含有大RNA和DNA。

RNA提取试剂盒工作原理：

首先采用一种包含非离子型洗涤剂的特殊细胞裂解缓冲液进行样品均质化。由于蛋白质保持完整，因此可取一部分裂解液直接用于常规蛋白质分析应用。剩余裂解液则采用了结合有机和固相提取优势、同时避免二者劣势的操作程序进行RNA的分离。

miRNA提取试剂盒操作说明书流程：

1.用1mlRNA-Solv®Reagent裂解细胞或组织（50-100mg植物组织），匀浆；

2.将匀浆液在室温下静置2-3min ；

3.向匀浆液中加入200μLlvfang，盖紧离心管的盖，剧烈振荡15s，冰浴10min；

4.4℃，12000g，15min离心。匀浆分离为下层的有机相和上层的水相。RNA留在上层水相中；

5.转移不超过80%体积的上清至一新的2.0ml离心管中，加入1/2体积的无水乙醇，振荡混匀；

6.涡旋振荡第5步中的混合物，然后将混合物全部转移至2mLHiBind®RNA Minicolumn中（每次吸取不超过700μL液体，多余700μL时逐次加入）。室温下10000*g离心30-60s，转移流出液至新的2ml离心管中（注意记录转移出的体积），以用于分离小RNA。

7.加入0.9倍流出液体积的无水乙醇至第6步的离心管中，涡旋振荡混匀。取一个HiBind®RNAMinicolumn，置于一个新的2ml收集管中；

8.取第7步的混合物加入吸附柱中，弃流出液；

9.重复步骤8，将剩余样品加入吸附柱中，10000g，30-60s，弃流出液； 

10.将吸附柱放在同一个2ml收集管中，添加500μlRWBWashBuffer，10000g，30-60s，弃流出液，重复使用收集管在第11步； 

11.再次添加500μLRWBWashBuffer洗柱，如第10步。10000g，30-60s离心，弃流出液。使用一空收集管，13000g，2min，来完全干燥HiBind®matrix；

12.洗脱miRNA。转移吸附柱至一新的1.5ml离心管中并在膜上加入15-30μL DEPC水（70℃预热效果更佳）。室温静置5min，然后13000g1min离心。如果预期的RNA超过20μg，进行二次洗脱。

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