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上次课程有句话让楼主印象深刻,Exosomesaresecretedbyallmammaliancelltypesinculture.
那如何去选择我们的实验样本?取样的时候需注意些什么?外泌体又如何保存呢?
上周四刚好赶上中秋,GCBI公众号也放了个小假,小编回来后赶忙补上上周高老师讲的外泌体样本收集与保存的课程,视频详情请戳:
外泌体的分离方法介绍
你研究的是哪种样本,需要特别注意哪些方面呢?一起来看看高老师的建议吧。
1细胞培养上清
2血液
受限于样本,血样一般取2ml。
那血浆or血清?
血浆=血液-血细胞
血清=血浆-纤维蛋白原-凝血因子
血清是血液凝固之后收集的液体,所以其中少了纤维蛋白原,凝血因子,以及多了很多凝血产物。纤维蛋白原可转化为纤维蛋白,具有凝血功能。
在凝血过程中血小板会分泌大量的外泌体,有研究发现血清中有接近50%的外泌体来自额外的分泌。
背后有啥解释呢?高老师在视频中有一一解答。
除了常见的细胞培养上清,血样,其他诸如唾液、鼻涕、尿液、乳汁及脑脊液如何收集呢?详情请戳视频。
课堂问答
1、微粒体和外泌体有什么区别?
微粒体是细胞破碎后,内膜系统的残体自发融合形成的小囊泡。外泌体是细胞分泌到胞外的直径为40-100nm的小囊泡,起源于内吞作用形成的内体。这两种小囊泡的起源和形成过程都不一样。
2、之前提取的外泌体忘记用PBS再洗一次,-80冻后1个月后再用PBS洗可以吗?
可以
3、采血后立即分离有没有文献支持?
有
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相关回复
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回复:时间:2016-09-27
AL47你好,我想请教一下~筛选疾病的bioMarker时,用血清血浆还是脑脊液更好一些呢?希望能得到你的回答,谢谢~你是研究什么疾病的?如果是精神类疾病,可以优先选择脑脊液,如果普通的,优先选择血浆,如果疾病与血小板相关,优先选择血清
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回复:时间:2016-09-26
棉子糖你是研究什么疾病的?如果是精神类疾病,可以优先选择脑脊液,如果普通的,优先选择血浆,如果疾病与血小板相关,优先选择血清谢谢你的回复~感激。我是研究神经系统疾病。但是脑脊液不好取得临床样本,尤其是对照组正常病人的脑脊液不好取得。再者脑脊液的外泌体含量比较低。血清不是应该比血浆更好一点么?
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