体液样本中细胞外囊泡的分析工具

PSCapture™外泌体ELISA试剂盒（链霉亲和素HRP）

　　本试剂盒是可用于细胞培养上清和体液样本中细胞外囊泡的定性分析以及定量分析的酶联免疫试剂。将能与细胞外囊泡表面的磷脂酰丝氨酸（PS）特异性结合的蛋白质预包被到板上，细胞外囊泡与其反应被固定后，以目的细胞外囊泡表面标记蛋白的生物素标记抗体作为检测一抗，以试剂盒中的HRP标记链霉亲和素为二抗，可高灵敏度检测表面具有靶标记蛋白的细胞外囊泡。同时，可用不同物种的生物素标记抗体作为检测一抗。此外，二抗采用HRP标记链霉亲和素，与血液成分的非特异性结合低，可高灵敏度检测血液样本中的细胞外囊泡。

◆特点

●　高灵敏度（灵敏度是WesternBlotting的50~1,000倍）

●　可直接定性或定量检测细胞培养上清和体液样本中的细胞外囊泡

●　可节省用于分析的细胞外囊泡数量（WesternBlotting的1/10~1/1,000以下）

●　可检测2倍以上稀释的血清和肝素血浆（相对于总反应量100μL，只需要50μL血清/肝素血浆）

◆检测原理

　　Wako试剂盒PSCapture™ ExosomeELISAKit（AntiMouseIgGPOD）（CodeNo.297-79201）（图右）中，一抗使用小鼠抗体，二抗使用抗小鼠IgG抗体，但是本试剂盒（图左），使用生物素标记抗体作为一抗，二抗使用HRP标记的链霉亲和素。因此，可以不受限于抗体种类分析细胞外囊泡。

◆数据

■　血液样本的稀释线性

准备血清，EDTA血浆和肝素血浆样本各2份，评估CD63检测中的稀释线性。

结果表明，在CD63检测中，血清和肝素血浆样本在双倍稀释或更高稀释度下可获得良好的线性。EDTA血浆样本在5倍以上稀释度下可获得良好的线性。

■　检测人正常血液样本中外泌体标记物的相对浓度

准备人血清（10个样本），EDTA血浆（9个样本）和肝素血浆（9个样本）作为正常血液样本，检测外泌体标记物CD63和CD9，以及被认为是癌细胞外泌体特异性标记物的EpCAM。

结果显示，在各个血液样本中均检测出了外泌体标记物CD63和CD9，但只有在癌细胞外泌体中才检测出极微量的表面抗原EpCAM。

■　COLO201来源纯化外泌体的添加回收测试

准备混合血清，EDTA血浆，肝素血浆的2倍稀释液，并添加从COLO201细胞培养上清中提取的3种浓度的COLO201来源外泌体，以EpCAM检测来确认回收率。

在EpCAM检测中，添加回收率在100％±10％的范围内，显示出良好的回收性能※。

※考虑到【血液检体的稀释线性】，EDTA血浆样本建议稀释5倍以上进行检测。

◆产品列表

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PSCapture™外泌体ELISA试剂盒（抗小鼠IgGPOD）

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