相关文章
促销商品
最新问答
- [07-30]用什么荧光染料标记质粒dna比较好
- [08-05]用不同荧光染料标记的抗体,分别与小鼠细胞和人细胞的细胞膜上的一...
- [07-31]奶牛高体细胞数的管理策略
- [01-17]微管蛋白Tubulin活细胞荧光探针/荧光染料_价格厂家供应商_艾美捷...
- [07-21]荧光染料的重要应用,以及如何判断亮度? | 每日生物评论
- [07-27]常用荧光染料的激发和发射波长
- [01-17]SYBR Green 1 荧光染料
- [01-17]FCM分析中对荧光染料的要求是_
- [01-17]荧光定量PCR:染料法VS探针法
精选品牌
热卖商品
我是一个新手。做了两次real-timePCR（SYBRGREENI）标准曲线都很差劲，请好心的大侠们帮忙指点迷津。
标准品是用质粒DNA做了。第一个图是按10倍梯度进行稀释,以10^3～10^9copy/μl7个浓度的标准模板系列作为标准品；第二个图是按10倍梯度进行稀释，以50～0.0005ng/ul6个浓度的标准模板系列作为标准品，得到的标准曲线的参数值分别是R^2＝0.87998694<0.99，Slope＝-1.403786（图一）；R^2＝0.9702126<0.99,slope=-1.5033078.
我应该从哪些方面来改进我的实验？紧急求助！
标准品是用质粒DNA做了。第一个图是按10倍梯度进行稀释,以10^3～10^9copy/μl7个浓度的标准模板系列作为标准品；第二个图是按10倍梯度进行稀释，以50～0.0005ng/ul6个浓度的标准模板系列作为标准品，得到的标准曲线的参数值分别是R^2＝0.87998694<0.99，Slope＝-1.403786（图一）；R^2＝0.9702126<0.99,slope=-1.5033078.
我应该从哪些方面来改进我的实验？紧急求助！
相关回复
-
已帮助 0人
-
已帮助 0人
-
回复：时间：2006-11-04
我想从两个方面来回答你的问题，一，你的质粒标准品在进行稀释时，你稀释的准确吗，一般是多取一点原样进行稀释以减少稀释误差；二，你用的荧光染料SYBRGREENI，此种染料可以跟所有的双链DNA结合，包括引物二聚体，包括其它的非特异性扩增，不知道你分析了你的熔解曲线了没有，看看是不是只有一个峰？建议你把你的熔解曲线的图也传上来。标准曲线好的话一般要求R^2＝0.99以上呢，至少应该是两个9。
-
已帮助 0人
-
回复：时间：2006-10-27
谢谢你。我是在别人实验室做的real-time，没有要到SDS的安装软件。明天我去把融解曲线拷下来，再请你看看。可能我稀释不准确，我是用TE稀释的，取1ul50ng/ul的溶液+9ulTE得到5ng/ul的溶液，再从1ul5ng/ul的溶液+9ulTE得到0.5ng/ul的溶液，以此类推，得到7个浓度的标准模板系列。是不是稀释不准确？
相关问题
- 1627581602用什么荧光染料标记质粒dna比较好
- 1628100001用不同荧光染料标记的抗体,分别与小鼠细胞和人细胞的细胞膜上的一...
- 1627668002奶牛高体细胞数的管理策略
- 1516139743微管蛋白Tubulin活细胞荧光探针/荧光染料_价格厂家供应商_艾美捷...
- 1626804001荧光染料的重要应用,以及如何判断亮度? | 每日生物评论
- 1627322405常用荧光染料的激发和发射波长
- 1516139785SYBR Green 1 荧光染料
- 1516139743FCM分析中对荧光染料的要求是_
- 1516139743荧光定量PCR:染料法VS探针法
- 1516139702荧光染料与多少dna结合肉眼可见颜色变化
- 1627149603【求助】关于荧光定量PCR加样量问题_PCR_生命科学仪器_仪器论坛
- 1627495202荧光分光光度计的简单使用说明
推荐产品
非常满意 
