VitalStainingofChromosomeswithHoechst33258

1.Hoechst33258,10mg/mlstockinDMSO.

2.Culturemedium.

3.15mlsterileconicaltube.

1.Ina15mlconicaltube,add1volumeHoechst33258stockto1000volumesofmedium.Need3mlforeachcoverlispdish.Mixthoroughly.

2.Removeallmediumfromtheculturedish,replacewiththedye-containingmedium.

3.Incubatefor30min.

4.Removedye-containingmedium.Rinsedishtwicewithregularmedium.

5.Addregularmediumtothedish.FluorescencecanbeobservedwithZeiss02UVfiltersetandquartz-halogenlamp.Mercuryarclampsyieldamuchhigherintensitybutcouldcausedamangetolivecells.

Note:thesameprotocolcanbeusedwithethidiumbromide.ReplaceHoechststocksolutionwith10mg/mlaqueousstocksolutionofethidiumbromide.

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