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How to prepare Molecular Biology grade glycogen
Overview GlycogencanconvenientlysubstitutefortRNAasacarrierfornucleicacidprecipitation.AlthoughMolecularBiologygradeglycogencanbepurchasedfromanumberofvendors,themaindisadvantageisthatitisveryexpensive(e.g.,About100dollars/20-40mg). HerewepresentasimpleandinexpensiveprotocoltopreparealargeamountofglycogenwhichissuitableforanykindofMolecularBiologyapplication(weroutinelyuseitforRNAwork). Procedure <>Startbydissolving5gr.ofglycogen(fromOyster,SigmaG8751)in10mlofmilli-Qwater.ExtractoncewithonevolumeofPhenolfollowedbyoneextractionwithonevolumeofChlorophorm.Addonevolumeofabsoluteethanoltothesupernatant,atthispointtheglycogenwillprecipitateinstantaneously.Collecttheprecipitatebycentrifugationandairdrycompletelythepellet.WeighthepowdersoobtainedandresUSPenditinautoclavedmilli-Qwaterataconvenientstockconcentration(10-20mg/mlissuggested).Storeinthefreezerin1-mLaliquots.
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