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Band Shift Assay
GelShift,orBandShiftAssay,orElectrophoreticMobilityShiftAssay(EMSA)isatechniqueforstudyinggeneregulationanddeterminingprotein:DNAinteractions.TheassayisbasedontheobservationthatcomplexesofproteinandDNAmigratethroughanon-denaturingpolyacrylamidegelmoreslowlythanfreeDNAfragmentsordouble-strandedoligonucleotides.Thegelshiftassayiscarriedoutbyfirstincubatingaprotein(s)(suchasnuclearorcellextract)witha32Pend-labeledDNAfragmentcontainingtheputativeproteinbindingsite.Thereactionproductsarethenanalyzedonanondenaturingpolyacrylamidegel.ThespecificityoftheDNA-bindingproteinfortheputativebindingsiteisestablishedbycompetitionexperimentsusingDNAfragmentsoroligonucleotidescontainingabindingsitefortheproteinofinterestorotherunrelatedDNAsequences.
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