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BUCCAL CELL DNA PREPS
BUCCALCELLDNAPREPS
Important:ExtracttheDNAwithinoneweekofreceivingsamples.Samplesthathavebeenprocessedshouldbefrozentopreventdegradation.Freezesamplesbetweenuseeachday.
1.Add600mlof50mMNaOHtoa1.5mlEppendorftubeandinsertbrushintube.(Clipoffhandleofbrushwithwirecutterssotubecanbeclosed.CuttersshouldberinsedwithEtOHbetweensamplestopreventcontamination.)
2.Vortexthoroughlytomix,foratleast10s.
3.Heatto95∫Cfor5min.
4.Spinbrieflytopoolcondensation.
5.Removebrushwithtweezers(tweezersshouldberinsedwithethanolbetweensamplestopreventcontamination)andadd60ml1MTrispH8.0totube.Vortextomixforatleast10s.
6.Spinfor1minuteat13,000rpmanddecantsupernatanttoacleanstoragetube.
7.Use2-5mlofsupernatantforstandardPCR.
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