1)按基本方案步骤1〜15进行。

2)将平皿在4℃冷却10min。用针扎孔标记各膜的位置。小心地揭起膜，室温下在空气中瞭干15min。

3)将膜浸于HEPES结合缓冲液/6mol/L盐酸狐中，4℃轻轻摇动温育10min。在新鲜的HEPES结合缓冲液/6mol/L盐酸胍中重复1次。

4)将膜浸于HEPES结合缓冲液/3mol/L盐酸胍（每10张膜50mL)中，4℃5min。重复4次。每次用HEPES缓冲液及浓度较前次减半的盐酸胍进行漂洗。

5)将膜浸于HEPES缓冲液（50mL/10张膜）中，4℃5min。用新鲜缓冲液重复洗1次。

6)在BLOTTO中温育封闭。

7)进行滤膜筛选。