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回复：时间：2021-08-20
PET-32a的Histag分别在前面的trx蛋白C端以及你的目标蛋白C端，如果你的目的蛋白在构建载体的时候自己加了终止子，那么你的目的蛋白C端是没有Histag的，也就是说唯一一个histag在trx与你的蛋白之间（PET32a是融合蛋白），这样，PET-32a提供的两个肽链内切酶（凝血酶和肠激酶）都是可以切掉的，当然，个人建议你用肠激酶，因为肠激酶酶切位点更贴近你的目的蛋白，而用凝血酶的话还有一个Stag。如果你在构建载体的时候，下游引物没有加终止子，那么你的蛋白的N端也会有一个HisTag，这时候你需要用TAGZyme了，这个酶专一性去除histag的。
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