其它重组蛋白

蛋白质复合体性质的研究一方案13 蛋白质阵列:阵列的探针标记方法及激酶底物相互作用的放射性印迹检测

1月28日获悉,由中国科学院华南植物园杨宝、蒋跃明等科研人员完成的“一种制备cinnamtannin B1的方法”获得国家发明专利授权(专利号:ZL 201410204144.9)。 荔枝叶为荔枝树的枝叶,全年可采,资源丰富。研究发现,荔枝核和荔枝壳中富含黄酮类化合物,具有抗氧化、抗癌、降血糖等生物活性,然而目前关于荔枝叶活性成分的研究极为有限,相关活性物质组成仍有待研究。 该发明公开了一种制备cinnamtannin B1的方法。该发明从荔枝叶中制备分离得到大量的cinnamtannin B1,其产率为51~196 mg/kg(纯度为85~95%)。该发明对于推动荔枝的深加工利用,提升荔枝产品附加值,促进该行业的可持续发展具有重要的意义。......阅读全文 方案13阵列探针标记及激酶-底物相互作用放射性印迹检测 实验材料合适的激酶目标蛋白制备有蛋白质阵列的玻片试剂、试剂盒ATPDektol 显影剂干燥剂激酶缓冲液照相用定影剂NTB-2 放射自显影感光乳液冲洗缓冲液仪器、耗材β-射线盒离心机孵育箱光学扫描显微镜实验步骤展开 蛋白质纯化 程序 分离纯化某一特定蛋白质的一般程序可以分为前处理、粗分级、细分级三步。前处理分离纯化某种蛋白质,首先要把蛋白质从原来的组织或细胞中以溶解的状态释放出来并保持原来的天然状态,不丢失生物活性。为此,动物材料应先剔除结缔组织和脂肪组织,种子材料应先去壳甚至去种皮以免受单宁等物质的污染,油料种子最好先用低沸点 小鼠β-actin基因的克隆表达(2) 实验步骤: (1)目的基因与表达载体的连接反应: ①表达载体和目的片段的酶切 用于表达监测的寡核苷酸分析实验1 用于表达监测的 mRNA 的扩增及其与寡核苷酸分析芯片的杂交实验材料样品 RNA试剂、试剂盒Superscript cDNA kit (Life Technologies)RNA 酶抑制剂制备对照转录池酚 氯仿 异戊醇乙酸铵乙醇10 X 转录缓冲液10 X rNTP 混合液T7 RNA 聚合酶RNe 噬菌体DNA从噬菌斑到滤膜的转移实验 一个从 λ 噬菌体文库中鉴别和分离特异重组子的方法,在分子克隆历史的早期由 Bemon 和 Davis (1977) 建立起来。这个目前仍经常使用的方法,包括通过用32P 标记的探针进行原位杂交以大量筛选噬菌斑。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理一个从 λ 噬菌 芯片毛细管电泳激光诱导荧光快速分离检测麻黄碱兴奋剂 实验方法原理研究用芯片毛细管电泳激光诱导荧光检测系统分离测定经7-chloro-4-nitrobenzo-2-oax-1,3-diazole(NBD-Cl)衍生的麻黄碱和伪麻黄碱的实验条件。采用胶束毛细管电动色谱分离体系(12 mmol/L SDS+10 mmol/L硼砂缓冲液,pH9.0),在45 紫外检测器优点 紫外吸收检测器不仅灵敏度高、噪音低、线性范围宽、有较好的选择性,而且对环境温度、流动相组成变化和流速波动不太敏感,因此既可用于等度洗脱,也可用于梯度洗脱。紫外检测器对流速和温度均不敏感,可于制备色谱。由于灵敏高,因此即使是那些光吸收小、消光系数低的物质也可用UV检测器进行微量分析。不足之处在于对紫外 高效反相液相色谱 实验方法原理反相色谱(reversed phasc chromatography, RPC)是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高,在高效液相色谱中这是应用面最广的一种分离模式,在生物大分子的反 SPA 各种免疫检测试剂制备实验——SPA 纯品 实验方法原理SPA 纯品系由含 A 蛋白的 Cowan I 株金黄色葡萄球菌中纯化获得。其制备过程除细菌培养外,主要有提取和纯化这两个工艺组成。提取方法多种,其中溶葡萄球菌素与亲和色谱组合方法最有效。现介绍如下。实验材料菌苔试剂、试剂盒Tris · HCl碳酸氢铵溶葡萄球菌素饱和硫酸铵仪器、耗材DE 硫酸亚铁铵的制备实验 实验方法原理铁屑易溶于稀硫酸,生成硫酸亚铁:Fe + H2SO4 = FeSO4+ H2↑硫酸亚铁与等物质量的硫酸铵在水溶液中相互作用,即生成溶解度较小的浅蓝色硫酸亚铁铵FeSO4·(NH4)2SO4·6H2O复合晶体。FeSO4+ (NH 正常细胞常规核型的标本制备_肿瘤细胞染色体标本制备 实验方法原理利用肿瘤细胞无限繁殖的特点,掌握其体外生长动态,取处于对数生长期的细胞便可获得丰富的分裂相。肿瘤细胞染色体异常包括两个方面:1. 结构异常 即在肿瘤细胞常出现的染色体畸变,包括双着丝点染色体、环状染色体、断裂的染色体、染色体裂隙及微小体等。2. 数目异 从96孔微培养板生长的哺乳动物细胞中分离DNA 本方案由 Ramirez-solis 等的方法 1992,1993 改进而成,是一种从微培养板的每个孔生长的真核细胞抽提基因组 DNA 的简便有效的方法。每个孔产生的基因组 DNA 足以做数次聚合酶链反应(PCR) 或者一次 Southern 杂交。对于制备用于 PCR 反应的基因组 DNA 的最佳 去除抗血清中交叉反应的抗体实验 试剂、试剂盒封闭缓冲液封闭试剂抗体LB 顶层琼脂糖LB 平板琼脂培养基仪器、耗材硝酸纤维素滤膜λ噬菌体载体cDNA 文库实验步骤材料缓冲液和溶液贮存液,缓冲液和试剂的组分请见附录 12。将贮存液稀释到适当的浓度。封闭缓冲液10 mmol/L Tris-Cl(pH8.0)150 mmol/L NaCl 黄酮苷的鉴别——颜色反应法 实验材料槐花米试剂、试剂盒蒸馏水乙醇浓盐酸镁粉氯化铝氯化铁氨蒸汽醋酸铅仪器、耗材试管水浴锅烧杯玻璃棒漏斗酒精灯紫外灯滤纸片黄酮苷一种茶多酚物质,属黄酮类。黄酮类(也称花黄素)泛指两个具有酚羟基的苯环(A环与B环)通过中央三个碳原子相互连接而成的一系列化合物。C杂环上的O有共用的电子对而具有弱碱性,能 人弥漫性大B细胞淋巴瘤小鼠肿瘤模型的建立——皮下种植法 人弥漫性大B细胞淋巴瘤小鼠肿瘤模型的建立可应用于:(1)深入研究淋巴瘤发病机理;(2)评价治疗药物;(3)研究建立人弥漫性大B细胞淋巴瘤小鼠模型的条件及肿瘤特点。实验方法原理采用SCID 小鼠皮下接种107细胞可成功地建立人人弥漫性大B 细胞淋巴瘤(DLBCL )移植瘤模型,成瘤率70% 质检总局2017专用仪器中标结果揭晓 729款相关仪器入围 (项目编号:0702-1741CITC5M05)序号包名/包名称品目名中标供应商中标型号币种中标价格(元)1第十四包:离心机A:超速制备离心机北京博信华科技贸易有限公司WX 80+人民币746,394.002北京博信华科技贸易有限公司WX 100+人民币789,904.003贝克曼库尔特商贸(中国) 人肝癌裸鼠皮下-肝原位移植瘤模型的建立实验 人肝癌裸鼠皮下-肝原位移植瘤模型可应用于:(1)研究恶性肿瘤生物学特性;(2)筛选抗癌药物。间接原位移植模型实验方法原理先用组织学完整的新鲜人肝癌组织接种于裸鼠皮下,形成皮下移植瘤,然后用此移植瘤组织再接种于裸鼠肝内,建立肝原位移植瘤模型(间接肝原位移植瘤模型),并将其与直接肝原位移植瘤模型、皮下移 人胃癌裸鼠原位种植转移模型的建立实验_OB胶粘贴法 人胃癌裸鼠原位种植转移模型建立可以:(1)完整地重现胃癌的临床转移过程;(2)建立有价值的胃癌转移模型;(3)进行肿瘤防治研究。实验方法原理以反复接种传代于裸鼠皮下的SGC-7901 人胃癌细胞株建立的移植瘤组织块为材料,将其用生物吻合OB胶原位粘贴于裸鼠胃壁,并与传统 胃囊法 相互作用蛋白的捕获实验 相互作用蛋白的捕获试验要经过两次连续大量的酵母菌平板筛选过程。酵母菌含有lexA 融合合探针,报道基因和插入pJG4-5的GAL启动子控制下的cDNA表达文库。实验材料酵母菌试剂、试剂盒CM培养基乙酸锂PEGTEDMSO甘油氨苄青霉素仪器、耗材离心机分光光度计摇床培养箱实验步骤1. 为了 MS培养基的配方及制备过程 培养基的配制 植物 组织培养中常用的一种培养基是MS培养基。MS培养基的配制包括以下步骤。 培养基母液的配制和保存 MS培养基含有近30种营养成分,为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量,可将培养基中的各种成分,按原量的20倍或200倍分别称量,配成浓缩液, 磷酸化蛋白鉴定实验 实验材料测序级膜蛋白酶试剂、试剂盒二硫苏糖醇碘代乙酰胺乙酸溶液甲酸乙酰氯仪器、耗材螯合琼脂糖凝胶层析介质实验步骤这里所述的方法概括为下列几个步骤:胰蛋白酶水解消化膜和可溶性组分中的蛋白质(见 24. 3.1 );固相金属螯合亲和层析(IMAC) 富集磷酸肽(见 24. 3. 2 );用串联质谱对磷酸 用缠绕法从哺乳动物细胞中分离DNA 实验方法原理本方法由 Bowtell 法(1987) 改进而成,可同时从许多不同细胞或者组织样品中制备 DNA。本方案中的主要步骤包括将 DNA 沉淀在细胞裂解液和乙醇的交界面上,接着将沉淀的 DNA 缠绕到一个 Shepherd 氏钩上。缠在钩上的 DNA 从乙醇溶液中转出溶于所选择的液体缓冲液。 原子吸收光谱法测定不同生长期施肥的柴胡中重金属含量 【摘要】目的考察栽培柴胡药材的重金属含量情况。方法收集不同生长期施肥的柴胡,以原子吸收光谱法测定样品中的铅、镉、砷、汞和铜的含量。结果所有样品的铅、镉、砷、汞、铜的含量均未超出限量范围。结论该法快速、可靠,为柴胡重金属元素的测定提供了一种简便方法。 【关键词】柴胡;重金属;原子吸收光谱 用GC、GC/MS方法检测人尿中Selegiline及其代谢物 实验方法原理本实验用GC、GC/MS技术对口服Selegiline Hydrochloride,一种单胺氧化酶抑制剂的尿中代谢物进行分析测定,确认检出10种代谢产物,其中三种为新检测到的羟基化代谢物。实验材料尿液试剂、试剂盒Selegiline5药片selegiline·HClamphetamine 动物的注射方法实验——皮下注射法 很多微生物学与免疫学实验均需利用动物,例如各种抗体,包括单克隆抗体的制备、药物对免疫功能的影响,菌苗与疫苗的安全试验以及各免疫机理的研究等都要通过注射方式在动物体内进行。实验方法原理实验材料小白鼠试剂、试剂盒灭菌生理盐水仪器、耗材注射器(1 ml)6 号针头消毒煮沸器碘酒棉花75% 酒精棉花消毒干棉 感受态制备:酵母感受态细胞制备实验 酵母感受态细胞制备可以:(1)用于建立酵母转化体系;(2)用于酵母表达系统构建;(3)用于酵母其他分子生物学研究。实验方法实验材料酿酒酵母 试剂、试剂盒YPDA液体培养基 蒸馏水 甘油 二甲基亚砜 仪器、耗材培养皿 离心机 离心管 冰箱 实验步骤一、试剂与耗材 1. 试剂细菌 单链DNA文库的SELEX筛选实验 单链DNA文库的SELEX筛选实验可用于:(1)体外诊断;(2)体内治疗等。实验方法原理SELEX 技术除了可以使用 RNA 文库以外,还可以使用单链 DNA 文库进行筛选。单链 DNA 形成高级结构的丰富性也足够用于对许多靶分子的筛选,而且 DNA 文库具有更好的稳定性,操作也相对简便。实验材料3 用S1核酸酶对RNA作图 三种不同的核酸酶——S1 核酸酶、RNA 酶、外切核酸酶Ⅶ被用来进行 RNA 定量,确定内含子位置,以及用来鉴定在克隆的 DNA 模板上的 mRNA 的 5 端和 3 端的位置。当检测 RNA 被杂交到 DNA 模板上时,用核酸酶 S1 进行保护试验的分析;当检测 RNA 被杂交 方案12 应用分子扫描器进行蛋白质组分析实验 试剂、试剂盒乙腈α-氰基-4-羟基肉桂酸(CHCA)α-甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯(TAME)氨基黑封端(capping)试剂考马斯亮蓝 R250HCl石蜡油PBS-TweenTris-Cl胰酶凝胶电泳试剂仪器、耗材电转膜仪电泳系统IAV膜MALDI 样品板质谱仪PVDF 膜旋转杂交仪UV 可见分光光 大肠杆菌细胞的破碎和包涵体的制备实验 实验材料过表达σ32 的大肠杆菌细胞株试剂、试剂盒氯霉素氨苄青霉素异丙基硫代-β-D-半乳糖苷利福平LB 培养基SDS 样品缓冲液脱氧胆酸钠仪器、耗材Oak Ridge 离心管带刻度的聚丙烯锥形离心管Tissue-TearorTM 匀浆器超声破碎器实验步骤材料与设备过表达σ32的大肠杆菌

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