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重组抗体表达纯化
1.成熟的序列优化技术,配合HEK293T改良细胞系,最大程度激发表达潜能,常规瞬时转染小试产量在10~200mg/L。
2.经过优化的稳定表达株,产量高达4.5g/L,可提供,亦提供50L以内的发酵生产服务。
产品编号 | 载体骨架说明 | 纯化方案 | |
AVH-1101 | pAZ-V5-hCH-IgG1 | HumanIgG1重链恒定区 | ProteinA/G |
AVH-1102 | pAZ-V5-hCH-IgG2 | HumanIgG2重链恒定区 | ProteinA/G |
AVH-1103 | pAZ-V5-hCH-IgG3 | HumanIgG3重链恒定区 | ProteinA/G |
AVH-1201 | pAZ-V5-hCH-IgM*3 | HumanIgM(allele3)重链恒定区 | ProteinG |
AVH-2101 | pAZ-V5-hCL-IgGκ | HumanIgGκ轻链恒定区 | * |
AVH-2102 | pAZ-V5-hCL-IgGλ1 | HumanIgGλ1轻链恒定区 | * |
AVH-3106 | pAZ-V5-h-IgG1Fc | HumanIgG1Fc片段 | ProteinA |
AVM-1101 | pAZ-V5-mCH-IgG1 | MouseIgG1重链恒定区 | ProteinA/G |
AVM-1102A | pAZ-V5-mCH-IgG2A | MouseIgG2重链恒定区 | ProteinA/G |
AVM-2101 | pAZ-V5-mCL-IgGκ | MouseIgGκ轻链恒定区 | * |
AVM-2102 | pAZ-V5-mCL-IgGλ1 | MouseIgGλ1轻链恒定区 | * |
AVM-3108 | pAZ-V5-m-IgG1Fc | MouseIgG1Fc片段 | ProteinA |
在获得了抗体轻(重)链可变区的前体下,为了获得高产量的,高特异性的重组抗体蛋白,我们会在多个方面进行资源调配和合理优化。
●根据抗体亚型和应用要求,选择恰当的恒定区骨架质粒。目前,我们可以提供小鼠、人、兔等物种的的恒定区骨架质粒,通过重组无缝克隆方式将可变区基因连入表达载体,无需客户重新基因合成或调取。可变区测序时,尽可能挑取多个阳性克隆,确认序列无误。
●我们筛选出来有多条高效率的抗体分泌信号肽,一般情况下我们使用来自于利钠肽V5高效信号肽进行分泌表达,当抗体部分泌或产量偏低时,我们可能会设计并构建多种信号肽的表达质粒平行试验,筛选最佳的信号肽方案。
●配合我们的抗体表达质粒,我们会有针对性的选择293和CHO相关细胞系,并摸索最佳的细胞转染条件,实现转染试剂品牌与用量、细胞培养成本、表达量的最佳配比,以期达到最经济科学的实验条件。
●常规实验设计中,我们根据FC的信息会选择ProteinA/G对重组抗体进行纯化,不会添加额外的融合标签,对于高纯度要求的抗体,使用AKATA进一步纯化,根据纯度和量的要求额外加收费用。
●常规的科研级别抗体表达订单中,客户可免费使用我们的表达体系,但我们最终只交付抗体终产物,不赠送表达体系及关键的技术信息。(合作开发项目另议)
补充说明
1.正常情况下,抗体蛋白的表达量都比较可观,但是某些突变序列产量会偏低,因此我们蛋白交付量跨度较大。
2.一般我们使用还原性和非还原性电泳检测重组抗体,如果客户需要验证抗体的特异性,需提供额外抗原使用WB检测。
3.我们使用哺乳动物细胞表达获得重组抗体,我们只承诺蛋白序列与设计相符,不承诺重组抗体具有客户预期的生理活性。
4.即使蛋白不表达或表达量极低,我们无法获得目的蛋白,我们也会提供全套的实验流程和原始照片。
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