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植物组织和细胞的显微化学染色实验一显示植物细胞后含物的方法
实验方法原理 | |
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实验步骤 | (1)淀粉:淀粉是植物的主要贮藏物质,它们在各种不同的植物细胞中形成各种形状小同的颗粒。一般来说,淀粉本身具有特殊的性状和光学特性,可以不必用专门的显微化学方法来检视,由于碘与淀粉作用可形成碘化淀粉而呈蓝色反应,用碘-碘化钾溶液来测试淀粉粒已成为最常用的方法。 (2)蛋白质:植物细胞中的蛋白质是构成原生质体的主要成分,也可成为后含物贮存于细胞内,可能是无定形的,也可能成为结晶体或成为糊粉粒。 ①较普遍的方法是用I-KI染色,显微镜下观察可看到被染成黄色的圆球状小颗粒,即为储藏蛋白质的糊粉粒。 ②氯化汞-溴酚蓝法是检测糊粉粒的最普通方法:在切片上滴加氯化汞-溴酚蓝试剂(氯化汞10g,溴酚蓝1mg,蒸馏水100mL)1滴,过5min后,用0.5%的醋酸冲洗,除去切片上多余的染料,再放在培养皿中水洗5mm,用甘油封藏,细胞中如有糊粉粒则被染成鲜蓝色。③曙红-酒精-苦味酸法也是显示糊粉粒的较好方法:在切片上滴上曙红-酒精-苦味酸试剂(配方曙红1g,溶于苦味酸的95%酒精饱和溶液50mL),镜检,当糊粉粒的基质现出蓝色时,加上数滴纯酒精,此时糊粉粒中球蛋白无色而结晶现出黄绿色,吸去多余酒精,用丁香油透明,加拿大树胶封固,最终蛋白质结晶应为黄色,球蛋白为粉红色,基质为暗红色。 (3)油脂:在植物解剖学研究中,常用苏丹Ⅲ(或苏丹IV)溶液对脂肪性物质进行染色切片浸入上述溶液中24h,然后用50%的酒精洗涤,加上甘油后观察,油脂可被染成淡黄至红色,栓质和角质也同样被染色。如果细胞中存在硬脂或脂肪酸结晶时,染色十分缓慢,可稍加热 (4)单宁:单宁的化学结构比较复杂,它是一种多元酚的衍生物,大多呈胶体状态,存在于植物细胞的液泡中,或形成单独的液泡。将切片浸人10%的氯化铁水溶液中(或加-些碳酸钠),单宁物质则被染成蓝绿色。 (5)橡胶:天然橡胶是异戊二烯的聚合物,植物组织中所含橡胶物质大多存在千乳汁管中,也有的存在于液泡中。对存在于乳汁管中的橡胶成分,可以用苏丹Ⅲ溶液染色材料应先用10%铬酸+70%酒精(使用前配制)固定24h,以使橡胶凝固,用刀片切去1-2mm,而后徒手切片,于载玻片上加上苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ溶液染色,乳汁管中的橡胶类物质被染成红色。 |
注意事项 | |
其他 |
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