实验六

细菌的荚膜染色

1

实验目的

•

掌握细菌的荚膜染色法

•

熟炼显微镜使用

2

实验原理

•

由于荚膜与染料间的亲和力弱，不易着色，通常采用负染色法染荚膜，即设法使菌体和背景着色而荚

膜不着色，从而使荚膜在菌体周围呈一透明圈。由于荚膜的含水量在

90%

以上，故染色时一般不加热

固定，以免荚膜皱缩变形。

3

实验器材

•

涂片染色用的细菌培养物

–

荚膜染色（钾细菌）

24h

的斜面培养物。

•

用滤纸过滤后的墨汁、复红染色液。

•

显微镜、松柏油、擦镜纸、吸水纸等。

4

实验步骤

•

（

1

）制片：取洁净的载玻片一块，加蒸馏水一滴，取少量菌体放入水滴中混匀并涂布。

•

（

2

）干燥：将涂片放在空气中晾干或用电吹风冷风吹干。

•

（

3

）染色：在涂面上加复红染色液染色

3

—

5min

。

•

（

4

）水洗：用水洗去复红染液。

•

（

5

）干燥：将染色片放空气中晾干。

•

（

6

）涂黑素：在染色涂面左边加一小滴墨汁，用一边缘光滑的载玻片轻轻接触墨汁，使墨汁沿玻片后

缘散开（夹角

30

度）

，然后推向另一侧，使黑素在染色涂面上成为一薄层，并迅速风干。

•

（

7

）镜检：先低倍镜，再高倍镜油镜观察。

•

观察：背景、菌体、荚膜、细菌形态等，并绘图。

5

实验记录（绘图）

6

思考题

•

荚膜负染法为什么不用热固定？

•

为什么包在荚膜内的菌体着色，而荚膜不着色？