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结缔组织染色实验一胶原蛋白、弹力蛋白和黏蛋白染色

蚂蚁淘  /发布时间:1533505700 /浏览量:41   

实验方法原理

黏蛋白是多糖与蛋白质结合的复合物，组织内含有硫酸根等成分，带有酸性物质，可称为酸性黏液（黏蛋白）。弹力纤维中的弹性蛋白由一种凝胶状的肽链组成，通过非极性吸附显色。胶原纤维是由纤维母细胞产生的一种胶原蛋白铰链而成，易与酸性染料结合。经过组合染色后，可分别显示胶原蛋白、弹力蛋白和黏蛋白成分。

实验步骤

阿尔辛蓝染色液：阿尔辛蓝（Alcianblue8GS，由上海试剂三厂生产）1g，冰醋酸3ml，蒸馏水97ml。

间苯二酚-复红染色液：间苯二酚2g，碱性复红2g，蒸馏水400ml，30％三氯化铁3ml，盐酸2ml。先将间苯二酚、复红和蒸馏水混合搅拌均匀，煮沸后加入三氯化铁，再煮沸搅拌3～5min，冷却后过滤。将滤纸上的沉淀物一起放在隔水式恒温箱中烤干，取出放入烧杯中，并加入95％乙醇200mU放在水浴锅内加热搅拌溶解，取出滤纸，盛于棕色试剂瓶内，再补20ml的95％乙醇，最后加入盐酸4ml，混合使用，室温下保存。


1.石蜡组织切片，常规脱蜡至水。


2.95％乙醇浸洗2次，浸入间苯二酚-复红染色液内1h左右。


3.直接用95％乙醇快速分化2次，浸入蒸馏水内1min。


4.阿尔辛蓝染色液染色15min，蒸馏水洗2次。


5.用3％乙酸液浸泡1min，蒸馏水洗2次。


6.滴染丽春红-苦味酸染色液3min。


7.无水乙醇脱水、二甲苯透明和中性树胶封固。

注意事项

1.间苯二酚-复红染色液装入试剂瓶中，将瓶口塞紧，放在冰箱内保存。


2.丽春红-苦味酸染色后，迅速脱水、过滤纸吸干，透明和封固。

其他

结果：黏蛋白呈绿色，弹力蛋白呈紫色，胶原蛋白呈红色，背景呈淡黄色。

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