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火箭电泳实验一火箭电泳
实验方法原理 | 在电场作用下,抗原在含定量抗体的琼脂介质中泳动,二者比例在合适时在较短时间内形成状似火箭或锥形的沉淀线,而此沉淀线的高度常与抗原量成正比关系,因此本法可以测定样品中抗原的含量。 | ||||||
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实验材料 | 待检血清 试剂、试剂盒 | 巴比妥缓冲液琼脂粉 仪器、耗材 | 微量进样器打孔器玻璃板电泳仪
实验步骤 | 1. 抗体琼脂板的制备:同单向扩散法,但注意稀释液应用pH8.6离子强度0.05M的巴比妥缓冲液。 2. 打孔见下图 ![]() 图1火箭电泳抗原孔位置图 3. 将用缓冲液稀释的适宜浓度的参考血清及适当稀释的抗原(人血清)分别加入各孔中,每孔10或20微升,要求加量准确而不外溢。 4. 把加完样的免疫琼脂板放入电泳槽中进行电泳,电压4~6伏/厘米,电泳时间1~5小时,直到大部分抗原孔前端出现顶端尖窄而完全闭合的火箭状沉淀线,关闭电源。 5. 取下琼脂板,以抗原孔中心为起点,量出各火箭状沉淀线的高度。同单向琼脂扩散法绘制标准曲线,查出待检血清中Ig含量。
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