克隆基因

2021-08-27请问用RNAi干扰抗凋亡基因的表达能否筛选出稳定转然的克隆?

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我想用RNAi干扰的基因具有抑制凋亡的功能。
昨天看了一篇文章,用antisense阻断BMP2(具有抑制凋亡的作用)的表达,不能筛选出稳定转然的克隆,因为发生了细胞凋亡。所以现在很迷茫,请各位老师帮忙!

谢谢!
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回复:时间:2003-11-08

再详细一点吧,否则很难帮到你的!我的专业里BMP2指骨形态发生蛋白2,再说了抗凋亡基因的knockdown效应应该是凋亡呀,做梯度转染观察凋亡就可以了,筛稳定克隆做什么?非要做的话,就用诱导型RNAi表达载体,可以在诱导前筛稳定克隆。

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回复:时间:2003-11-03

多谢liven老师!其实我不做BMP2,文献上说它是TGF-B超家族的成员之一,与细胞凋亡有关。筛选稳定克隆我想看看它与其它基因或蛋白的关系。请问什么是诱导型RNAi表达载体?谢谢!

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回复:时间:2003-11-06

好像现在有TetOn型的RNAi载体,用GOOGLE查查看!

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回复:时间:2003-11-09

sunyy1976我想用RNAi干扰的基因具有抑制凋亡的功能。昨天看了一篇文章,用antisense阻断BMP2(具有抑制凋亡的作用)的表达,不能筛选出稳定转然的克隆,因为发生了细胞凋亡。所以现在很迷茫,请各位老师帮忙!谢谢!能否提供该文,学习学习!!

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回复:时间:2003-11-03

我不会上传文章,就先发送到victoh的信箱。不好意思,我写得有错误,不是用的antsense,是转染的点突变的BMP2的质粒。

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回复:时间:2003-11-08

收到了,谢谢!可以帮你上传吗?

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回复:时间:2003-11-06

可以,谢谢!liven老师,我听说tet挺难做的,我想问一下哪个公司的siRNA表达载体比较好用,转染哺乳动物细胞的。谢谢!

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回复:时间:2003-11-06

sunyy1976可以,谢谢!BMP1Bapoptosis.part1.rar(390.63k)

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回复:时间:2003-11-02

2Pt2BMP1Bapoptosis.part2.rar(296.63k)

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回复:时间:2003-11-06

Teton的PolIII的表达载体出现于2000年的humangenetherapy,去年又出现了几篇文献,难道大家都没有注意吗?使用PolII启动子可以达到组织特异性,已经有文献报道使用PolII启动子引导siRNA表达获得了满意的结果。

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回复:时间:2003-11-05

liven主任:能否将关于使用PolII启动子引导siRNA表达和Teton的PolIII的表达载体的文章发到我的邮箱happy_qiu@yeah.net或告知文章在哪个期刊,哪卷哪期第几页,谢谢!