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回复:时间:2004-11-23
方法有两个,一个是用常规的PCR方法来调序列。如果你知道改基因的序列,可以通过查找改基因的上有序列。通常在基因转录起始点的上有,如果你对基因的表达不清楚,先坐RACE来确定5UTR序列,让后上游序列大概200-1000KB是基因启动子,先用软件分析是否有产规的转录因子结合位点,然后可以克隆后分析是否有启动子活性。如果你不知道全序列,用genomicwalking的方法,可以购买试剂合,从已知序列设计下游引物,向上游walking.上游引物是已知的,具体原理是用平端酶切基因组DNA,然后用平端连接引物(已知),连接构成不同大小的DNA模板库,这样两端的引物是知道的,而你的基因序列也是知道的,可以在基因上面设计引物(两个)来扩增。具体方法如果游问题再问。开始前要好好读通说明书,否则很难拿到正确结果的。
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