细胞分离

酵母遗传学方法12:酵母菌落PCR方法

酵母菌落PCR方法

1.在冰上配制反应混合液:

2μl10×菌落PCR缓冲液

1.2μl25mmol/LMgCl2

0.4μl10mmol/LdNTPs

10pmol引物(每一种引物)

0.2μlTaqDNA聚合酶(5U

加水到总体积为20μl

2.移液加微量细胞(约0.25μl)到PCR反应混合液中(20μl反应体积)

3.PCR循环参数:

944分钟

941分钟

551分钟

722分钟

35个循环

7210分钟

4.上全部样品进行琼脂糖电泳。

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