竞争法ELISA
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我做一个小分子的竞争法ELISA实验，抗体是购买来的。
我采用抗体包板，用小分子标记hrp与样本小分子进行竞争实验，做出来的结果的IC50一直在10ng/ml的标准品浓度左右浮动，是否说该抗体只能达到这样的灵敏度要求了，还是说还可以有些其他可以做最后的拯救呢？毕竟卖一个抗体价格也不便宜啊，实验还做不出来的话，老板要发火了…………
我采用抗体包板，用小分子标记hrp与样本小分子进行竞争实验，做出来的结果的IC50一直在10ng/ml的标准品浓度左右浮动，是否说该抗体只能达到这样的灵敏度要求了，还是说还可以有些其他可以做最后的拯救呢？毕竟卖一个抗体价格也不便宜啊，实验还做不出来的话，老板要发火了…………
相关回复
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回复：时间：2008-10-31
不知道你的抗体和小分子的亲和力如何，如果亲和力高的话会提高敏感性。不知道你做这个试验的目的何在？一般你的样品小分子浓度在什么范围呢？并不是一定非要越低越好啊，要涵盖你能检测的量的范围。
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回复：时间：2008-10-27
要提高灵敏度我有两个建议：1、对抗体包被浓度进行调整，一般来说，包被浓度低一些，会有利于灵敏度提高，但是不能太低。2、小分子与Hrp标记比率：小分子与HRP摩尔数比例越小越好，我推荐比值为1最好，这样标记物灵敏度最高。
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