2010-11-11【求助】竞争法做ELISA时，加入血清孵育后，抗体就不再结合到微孔板上了

抗原与抗体反应并不是一对一的，同一个抗原可以与不同的抗体发生反应，从而特异性的结合。因为抗原是比较大的，它上面有很多个不同的表位，每一个表位都可以对应一个抗体。你用抗原包被本身就是不对的，血清中针对该抗原的抗体可能有很多种，你检测的只是其中一种，当加入血清后，血清中你的抗体可能并不是占多数的，所以被竞争性的抑制掉了。

可能性1：血清中抗原含量较高，将抗体全部竞争掉。可能性2：血清中含有某些杂质，影响酶标反应。

展开引用kern6549抗原与抗体反应并不是一对一的，同一个抗原可以与不同的抗体发生反应，从而特异性的结合。因为抗原是比较大的，它上面有很多个不同的表位，每一个表位都可以对应一个抗体。你用抗原包被本身就是不对的，血清中针对该抗原的抗体可能有很多种，你检测的只是其中一种，当加入血清后，血清中你的抗体可能并不是占多数的，所以被竞争性的抑制掉了。......兄，谢谢你的回复。关于血清中的成分竞争性的抑制掉我目的抗体和目的抗原我很赞同。我就是在怀疑到底是血清中什么成分具有这样的抑制效果，让抗原抗体不能结合。对了，可能您没有仔细看我说的第一句话，我的这个抗原是单表位的，抗体也特异只针对该表位，理论上讲特异性是很强的。不知道是不是血清中的其他一些可能影响我的抗原抗体结合的因素存在，我在想，如果我找到这种影响的因子，想办法把该因子在检测前从血清中剔除掉，这样就可以用于检测了。