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微生物液体培养实验一过夜培养法
液体发酵生产是将发酵原料制成液体培养基,接种微生物,通过其代谢活动,使发酵原料转化成发酵产品。液体发酵有表面发酵和深层发酵两种方式,其中深层发酵是发酵生产的主要方式。
3 收藏 841 阅读1. 取5 ml 液体培养基加入一支无菌的16 mm 或18 mm 的培养试管中。
2. 用接种环挑一个单菌落,浸没于培养液中并轻轻振动接种环,使待接种的细菌分散在培养液中。 3. 盖好试管,在摇床或转鼓式培养装置上以60 r/min 速度。
4. 于37 ℃培养至饱和(约6 h)新鲜培养至饱和期的培养液细菌浓度大约为1X109~2X109细胞/ml。
1. 按1:100的比例将过夜培养物加入到一个无菌烧瓶中,烧瓶的体积应该是培养液体积的5倍以上。
2. 于37℃,约300 r/min 剧烈揺动培养。
一、利用计数板检测 1. 用一片干净的盖玻片盖住一片干净的计数玻片或者petraff-Hausser小室,参见下面。
2. 用含少量培养液的吸管接触盖玻片的边缘。 3. 在相差显微镜400倍下观察,并且按一个小方块中所见的每个细菌大约相当于2x107细胞/ml,计算浓度。
二、利用分光光度计检测
1. 稀释培养液至OD600<1。
2. 按每0.1 OD值大约相当于108细胞/ml计算细菌浓度。
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