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2018-01-25如何确定某种因子在信号传导通路的上游或下游？

lynnli2010
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请教大家，如何确定某种因子在信号传导通路的上游或下游，前提是不清楚该信号传导通路的路径，请回答的详细一些，十分谢谢！
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回复：时间：2018-02-03

确定某种因子在信号传导通路的上游或下游方法：　　将两种因子A和B分别做基因沉默，沉默A gene 看看A和B表达的情况，然后沉默B gene 再看看A和B表达的情况。上游的因子被沉默表达后，下游的因子肯定表达下调或不表达。而下游因子被沉默表达后，上游因子的表达不会受影响。还可以做个免疫共沉淀，看看上游因子是不是直接结合（作用）于下游因子的基因启动子区，开启下游表达。如若不是，可能另有其他的环节在中间过程。

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回复：时间：2018-02-02

将两种因子A和B分别做基因沉默，沉默Agene看看A和B表达的情况，然后沉默Bgene再看看A和B表达的情况。上游的因子被沉默表达后，下游的因子肯定表达下调或不表达。而下游因子被沉默表达后，上游因子的表达不会受影响。还可以做个免疫共沉淀，看看上游因子是不是直接结合（作用）于下游因子的基因启动子区，开启下游表达。如若不是，可能另有其他的环节在中间过程。

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