信号通路

2018-01-25如何确定某种因子在信号传导通路的上游或下游?

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请教大家,如何确定某种因子在信号传导通路的上游或下游,前提是不清楚该信号传导通路的路径,请回答的详细一些,十分谢谢!
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回复:时间:2018-02-03

确定某种因子在信号传导通路的上游或下游方法:  将两种因子A和B分别做基因沉默,沉默A gene 看看A和B表达的情况,然后沉默B gene 再看看A和B表达的情况。上游的因子被沉默表达后,下游的因子肯定表达下调或不表达。而下游因子被沉默表达后,上游因子的表达不会受影响。还可以做个免疫共沉淀,看看上游因子是不是直接结合(作用)于下游因子的基因启动子区,开启下游表达。如若不是,可能另有其他的环节在中间过程。

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回复:时间:2018-02-02

将两种因子A和B分别做基因沉默,沉默Agene看看A和B表达的情况,然后沉默Bgene再看看A和B表达的情况。上游的因子被沉默表达后,下游的因子肯定表达下调或不表达。而下游因子被沉默表达后,上游因子的表达不会受影响。还可以做个免疫共沉淀,看看上游因子是不是直接结合(作用)于下游因子的基因启动子区,开启下游表达。如若不是,可能另有其他的环节在中间过程。