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回复:时间:2018-03-28
miRNA引物设计(茎环法+染料法检测)设计方法:通用茎环后端加miRNA后面6个碱基的反向互补序列为反转录引物,正向引物为miRNA去除后面6个碱基的序列,反向引物在茎环上。反转录茎环通用序列:GTCGTATCCAGTGCGTGTCGTGGAGTCGGCAATTGCACTGGATACGACmiRNA序列:>mmu-miR-99b-5pMIMAT0000132 Mus musculus miR-99b-5pCACCCGUAGAACCGACCUUGCGmmu-miR-99b-5p反转录颈环引物为:GTCGTATCCAGTGCGTGTCGTGGAGTCGGCAATTGCACTGGATACGACCGCAAG定量PCR反向引物为:TGTCGTGGAGTCGGC正向引物为:CACCCGTAGAACCGAC
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