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回复：时间：2018-02-01
实时定量的引物设计要求比较高，可以按普通引物设计的方法来做，但是设计时要注意扩增的片段不能太大，最好在250bp-100bp之间。同时要保证这对引物有绝对的特异性，因为要是产生非特异性扩增的话，就不能准确的计量模板量了，这样就失去了实时定量的意义了
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回复：时间：2018-01-26
不是一回事荧光PCR是为了检测mRNA表达水平所以只要在整条mRNA上选取特异性好的一段两百bp左右的序列扩增就可以了普通PCR是为了扩增特定的片段或者基因设计在哪是要看你需要扩增哪部分的
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