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各位好！
附件中是我的标准曲线结果，标准品按照10x稀释，荧光染料是SYBR，可是在荧光强度与CT值的关系图中，曲线间的行距还可以接受，但是在LOG荧光值与CT值的关系曲线中，曲线怎么那么难看呢？为什么他们之间的行距不是相等的呢？我以前做的曲线很漂亮的，这是什么原因呢？影响定量的结果吗？并且在样品中也出现这么难看的曲线，就是指数增长期曲线不平滑，是什么原因呢？
切盼高手指点！！！
standardcurve.doc(49.0k)
附件中是我的标准曲线结果，标准品按照10x稀释，荧光染料是SYBR，可是在荧光强度与CT值的关系图中，曲线间的行距还可以接受，但是在LOG荧光值与CT值的关系曲线中，曲线怎么那么难看呢？为什么他们之间的行距不是相等的呢？我以前做的曲线很漂亮的，这是什么原因呢？影响定量的结果吗？并且在样品中也出现这么难看的曲线，就是指数增长期曲线不平滑，是什么原因呢？
切盼高手指点！！！
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回复：时间：2008-10-10
空白对照CT=30时出现阳性结果，基本上相当于没有扩增了，可能是因为有引物二聚体。你看融解曲线呢，它的峰应该不会和你的目的片段的峰重叠。我的实验中也是这样的。把引物量减少试试。这个没关系的。
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