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附件中是我的标准曲线结果,标准品按照10x稀释,荧光染料是SYBR,可是在荧光强度与CT值的关系图中,曲线间的行距还可以接受,但是在LOG荧光值与CT值的关系曲线中,曲线怎么那么难看呢?为什么他们之间的行距不是相等的呢?我以前做的曲线很漂亮的,这是什么原因呢?影响定量的结果吗?并且在样品中也出现这么难看的曲线,就是指数增长期曲线不平滑,是什么原因呢?
切盼高手指点!!!
standardcurve.doc(49.0k)
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回复:时间:2008-10-10
空白对照CT=30时出现阳性结果,基本上相当于没有扩增了,可能是因为有引物二聚体。你看融解曲线呢,它的峰应该不会和你的目的片段的峰重叠。我的实验中也是这样的。把引物量减少试试。这个没关系的。
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