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血清纯化蛋白
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2021-08-21如何去除血清中的蛋白，急急急

wyz34
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我要测小鼠血清中游离氨基酸的组分和含量，但是前提就是要去除干净血清中的蛋白质。想问问通过什么方法能够去除干净呢》要简便的方法。上机前最后的步骤好像是加入磺基水杨酸。
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回复：时间：2018-01-17

盐析，中性盐使蛋白质脱去水化层而聚集沉淀。eg.硫酸铵 有机溶剂沉淀，极性有机溶剂降低介点常数使蛋白质凝集沉淀。eg.甲醇、乙醇、丙酮。磺基水杨酸也可以沉淀蛋白质，但要加酸调节ph，使之低于血清蛋白的pi，使蛋白质带正电荷，与水杨酸酸根结合生成不溶盐而沉淀。血清蛋白质均带负电荷，但各种蛋白质带负电荷的程度有所差异，以白蛋白为最多。而血清白蛋白等电点为4.7－4.9。所以把ph调到4.7以下就可以了。

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回复：时间：2018-01-15

你要的是什么?如果要DNA的话离心3500rpm,10min,沉淀是蛋白质

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回复：时间：2018-01-13

取新鲜血清2ml，加入等量PBS和饱和硫酸铵溶液，混匀后静止30min，3000rpm离心10min，沉淀物即是γ?球蛋白。该步骤可重复1?2次，以保证纯度。将γ?球蛋白通过SephadexG?25层析作用，用PBS洗脱，除去蛋白质中的小分子铵盐，从而达到γ?球蛋白纯化的目的。洗脱下来的收集液可以用磺基水杨酸检测蛋白质的存在，用奈氏试剂检测是否除净NH4+,然后把含有γ?球蛋白的样品合并收集。用磺基水杨酸沉淀蛋白质产生化学反应啦，蛋白质里面含的成份是钙，水杨酸里面喊有CO3离子，两者结合行成CACO3为白色沉淀物从而达到去处血清中的蛋白的目的

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回复：时间：2018-01-14

你好，我想问下你这问题怎么解决的？

有用（0）

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回复：时间：2018-01-14

应该是双缩脲试剂

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