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2006-02-15【请教】抗原蛋白不纯得到的抗血清如何纯化

qianqun
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his-tag的蛋白，40多kD，提的包涵体，溶解后有不少杂带，大小条带都有，相对量倒是不大。现在兔子已经四免了，得到了抗血清。该如何纯化血清，得到较多的针对目的蛋白的抗体呢。
可以先用柱子提纯包涵体里的his-tag蛋白，然后再IP么？
谢谢
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相关回复

已帮助 0人

回复：时间：2006-02-25

既然你的his-tag蛋白不纯就不能用亲和层析纯化,如果要得到抗体可以用proteinA纯化,但得不到特异的抗体.

有用（0）

已帮助 0人

回复：时间：2006-02-16

其实是这样的，我免疫兔子的样品少纯化了一步：即从溶解的包涵体里提纯his-tagged的目的蛋白（当时想省事，没想现在费死事了）我想问问；能否用Cobeads先提纯目的蛋白，然后从抗血清里“钓”相应的抗体，然后洗脱抗体？但不知抗原抗体结合，和抗体洗脱用什么buffer

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